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    IC点不显,一文带您一探究竟
    时间:2020-10-16 浏览次数:

    目前,宫颈癌是人类所有癌症中唯一原因明确,可以早期预防和治疗并彻底根除的癌症。其早期治疗的5年生存率接近100%,晚期治疗5年生存率为20-50%。由于宫颈癌的发生与高危型HPV持续感染有99%以上的相关性,所以进行HPV检测,对HPV感染者进行及时、有效的干预对预防宫颈癌的发生起到关键作用。


    HPV分型核酸检测的意义

    不同的HPV型别,导致的疾病不同,不同的高危型别HPV感染致病能力也存在差异。

    尽管高危型HPV感染是子宫颈癌发生的必要条件,但不同型别的高危型HPV感染后,进展为子宫颈病变和浸润癌风险,以及相关浸润癌的预后,有所不同。研究发现,全世界近70%的宫颈癌是由HPV16和18亚型导致的,HPVl6、18、58、59型为鳞癌的常见类型,HPVl8型则为腺癌、腺鳞癌和小细胞癌的常见类型,HPVl6型在腺癌中所占的比例也较大。通过HPV分型检测可以预测受检者发病的风险度,确定最佳的治疗时期和方案。  

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    HPV分型可区分单一感染和多重感染

    多种HPV基因型的存在可能会增加持续HPV感染的时间长度及癌变的风险。通过HPV分型检测判断感染是单一感染还是多重感染,至关重要。

    HPV分型可区分持续(重复)感染与一过性感染,从而提高常规筛查或检査随访的特异性

    感染HPV后,超过90%的人机体免疫系统可以在2年内清除HPV病毒。高危型HPV持续性感染的危险系数要高于一过性感染,通过HPV分型检测进行甄别,将持续(重复)感染的患者与一过性感染患者分开管理,对于预防癌变、提高预后效果有重要意义。


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    人乳头瘤病毒基因分型(25型)检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)是Promotor®宫颈癌筛查系列中精准化筛查一员,可以同时检测临床常见的25种HPV基因型别,从而预测受检者感染发病的风险程度,协助临床确定最佳的治疗时期和方案。

    在Promotor® HPV25分型检测试剂盒里,每张膜条设置有CC(结合质控点)和IC(内参质控点),监控整个抽提过程和杂交过程,防止假阴性和假阳性的产生。

    那么当HPV25分型试剂检测结果中,出现IC点显示弱或无的情况,我们可以从哪些方面进行排查呢?

    常见IC点显示异常的4种情况分析:

    01 杂交结果IC点显示弱,同时HPV分型阳性点显示不清晰或较淡

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    (图:IC点、HPV16阳性点显示弱)


    02 杂交结果IC点、HPV分型阳性点显示均无

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    (图:IC点、阳性点均无)


    03 杂交结果IC点无,同时HPV分型阳性点显示淡或不清晰


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    (图:IC点无、HPV53阳性点显示弱)


    ☝  异常结果1、2、3,排查可能原因有:

    ❶.  样本采样前是否违反了取样要求;

    ❷.  操作人员煮沸法提取DNA时弃上清注意保留沉淀;

    ❸. DNA样本中有对PCR反应的抑制物质,影响了PCR扩增的效率(例如:样本经过碘染色或者病人使用了阴道冲洗药物,均会对PCR反应产生抑制)。可对样本进行稀释后,重新PCR扩增及杂交反应可解决;;

    ❹.  反应液配制是否有误,没有加反应液2可能会造成该现象;另外可以从膜条是否背景干净初步判断是否有加PCR产物。

    ❺ .  确保PCR产物完全变性成单链,如有必要在使用前再次变性PCR产物; 

    ❻.  杂交温度控制不当,出现非特异性杂交点,对结果造成影响;



    04 膜条背景较高,导致IC点显示不清晰


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    (图:膜条背景高,导致显示不清晰)


    ☝  异常结果4,排查可能原因有:

    ❶.  杂交液A、C顺序用反或者杂交液A并未稀释;

    ❷.  结合液浓度配制过高;

    ❸.  结合后杂交液A洗膜未充分;

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